基因敲入小鼠

基因敲入可以在目的基因位置引入特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點突變(模擬人類遺傳疾病模型) ；或?qū)蟾婊?如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等)通過同源重組的方式引入目的基因的特定位點，從而可以通過報告基因來跟 蹤目標(biāo)基因的表達。也可以用報告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI發(fā)生。

應(yīng)用

1、用于藥物篩選相關(guān)研究；

2、用于信號通路的研究；

3、用于示蹤的相關(guān)研究。

基因敲入小鼠

建系原則與流程

1、去除抗性基因 Neo：選擇陽性TurboKnockout KI小鼠與野生型小鼠雜交，獲得去除打靶載體中的 Neo 基因的雜合子F1 代小鼠；

2、再挑選一對雜合子F1 代小鼠進行自交，通過 PCR 鑒定篩選得到去除Neo的F2代純合子KI小鼠。

野生型小鼠雜交

TurboKnockout基因敲除：實現(xiàn)跨越“嵌合體”階段且自刪除Neo，減少兩代繁育時間

基于ES打靶技術(shù)的TurboKnockout技術(shù)采用了獨特的建系和基因改造技術(shù)，建立了具有高效遺傳優(yōu)勢的TurboKnockout ES細胞系，通過特定胚胎發(fā)育階段的顯微注射，使TurboKnockout ES細胞****代替內(nèi)源ES細胞，從而實現(xiàn)跨越“嵌合體”階段，把ES打靶構(gòu)建周期縮短至6-8個月。并且TurboKnockout采用獨特的Self-deleting Neo Cassette所獲得的TurboKnockout小鼠與任何品系小鼠交配，都可以****自刪除Neo。也就是說，TurboKnockout不僅實現(xiàn)跨越“嵌合體”階段，還能真正自刪除Neo，從而快速獲得去除Neo的雜合子小鼠。